目的 观察高频及低频重复经颅磁刺激(rTMS)治疗对急性一氧化碳(CO)中毒迟发性脑病(DEACMP)实验鼠的脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)信号通路的表达及MBP含量的影响并探讨疗效。
方法 采用Morris水迷宫筛选出24只认知合格的SD大鼠,采用随机数字表法选取6只为空白组(NC组),余18只建立DEACMP模型后随机分为假刺激组(Sham组)、高频治疗组(5 Hz组)及低频治疗组(1 Hz组),每组6只。高频、低频治疗组分别给予5、1 Hz rTMS治疗,Sham组给予假刺激。治疗后通过Morris水迷宫评估实验鼠的认知功能。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察实验鼠海马区的损伤情况,酶联免疫吸附法(ELISA)分析BDNF、TrkB、髓鞘碱性蛋白质(MBP)血清浓度,免疫组织化学(IHC)染色法检测BDNF、TrkB、MBP阳性表达。
结果 (1)Morris水迷宫结果:CO中毒21 d,平均逃避潜伏期比较,NC组<5 Hz组<1 Hz组<Sham组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)HE染色结果:NC组海马区细胞排列齐整、界清且胞数正常,Sham组海马区细胞排列紊乱、胞数减少且部分出现核固缩坏死,1 Hz组、5 Hz组海马区细胞排列较为齐整,偶有细胞坏死。(3)ELISA分析结果:与NC组相比,Sham组的BDNF和TrkB表达含量降低,MBP表达含量上升,差异均有统计学意义(P<0.05);1 Hz组和5 Hz组的BDNF、TrkB表达含量较Sham组明显上升,MBP表达含量较Sham组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)IHC染色结果:与NC组相比,Sham组中BDNF和TrkB的平均光密度值降低,差异均有统计学意义(P<0.05);1 Hz组和5 Hz组BDNF、TrkB的平均光密度值均高于Sham组,差异均有统计学意义(P<0.05);Sham组的MBP平均光密度值明显高于NC组,1 Hz组和5 Hz组的MBP平均光密度值均低于Sham组,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论 高频(5 Hz)和低频(1 Hz)的rTMS均可改善DEACMP实验鼠的认知功能,可能作用机制是通过上调BDNF/TrkB通路表达改善脱髓鞘病变,使MBP的表达含量降低,从而提升认知能力。