目的 探讨依达拉奉预处理对延长急性缺血性脑卒中(AIS)大鼠模型溶栓时间窗的影响及作用机制。
方法 选取健康SD大鼠64只随机分为假手术组、AIS组、重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)治疗组及rt-PA+依达拉奉治疗组,采用大鼠自体血栓构建AIS模型。采用Longa评分对各组大鼠在AIS后的神经功能进行评价,采用TTC染色法测定脑梗死体积,原位缺口末端标记观察大鼠脑内细胞凋亡的变化,酶联免疫吸附试验检测脑内活性氧(ROS)水平及超氧化物歧化酶(SOD)水平,硫代巴比妥酸检测脑内丙二醛(MDA)的含量,比色法检测脑内血红蛋白含量,Western blot实验检测ROS/TXNIP/NLRP3通路相关ASC、TXNIP、Caspase-1、IL-18和IL-1β的蛋白表达水平。
结果 rt-PA+依达拉奉治疗组在造模后6、7 h干预的大鼠的Longa评分较rt-PA治疗组降低,而且不同干预时间点的脑水肿程度和脑梗死体积改善情况均优于rt-PA治疗组,细胞凋亡率明显低于AIS组和rt-PA治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。与rt-PA治疗组比较,rt-PA+依达拉奉治疗组在造模后7 h干预的大鼠ROS蛋白水平、MDA水平、血红蛋白含量均显著降低,在造模后7、8 h干预的大鼠SOD水平高于rt-PA治疗组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。rt-PA治疗组及rt-PA+依达拉奉治疗组在造模后4.5 h干预的大鼠NLRP3、ASC、IL-18和IL-1β蛋白表达水平较AIS组下降,而且rt-PA+依达拉奉治疗组在造模后6、7 h的ASC、TXNIP、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与rt-PA治疗组比较,rt-PA+依达拉奉治疗组在造模后6 h干预的大鼠NLRP3的蛋白表达水平,造模后7 h的ASC、TXNIP蛋白表达水平,以及在造模后7、8 h的IL-18蛋白表达水平均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论 依达拉奉预处理可以适当延长AIS大鼠rt-PA治疗的溶栓时间窗,其作用机制可能与ROS/TXNIP/NLRP3通路的参与有关。